La eficacia de la esterilización de los medios de cultivo afecta directamente a los datos experimentales. Son muchos los factores que influyen en la esterilización, entre ellos los tipos y las cantidades de bacterias contaminantes, así como la elección del tiempo y la temperatura de esterilización. Hoy compartiremos los principales factores que afectan la esterilización de los medios de cultivo.
I. Definición de esterilización de medios de cultivo
Proceso que consiste en eliminar o destruir las células vegetativas y las esporas bacterianas viables de un medio de cultivo mediante métodos físicos o químicos.
II. Objetivo de la esterilización de los medios de cultivo
Para eliminar los microorganismos del medio de cultivo, creando condiciones estériles para los procesos de fermentación posteriores.
III. Requisitos para la esterilización de los medios de cultivo
1. Alcanzar el nivel de esterilidad requerido: 10⁻³
2. Minimizar la pérdida de nutrientes.
IV. Métodos de esterilización de los medios de cultivo
1. Esterilización química
2. Esterilización por filtración
3. Esterilización por calor húmedo
V. Selección de la temperatura de esterilización del medio de cultivo
1. Se debe tomar en cuenta la temperatura letal por calor de los microorganismos (debe ser superior a esta temperatura, que generalmente se basa en las esporas);
2. Al tiempo que se garantiza la eficacia de la esterilización, minimizar la destrucción de los nutrientes en el medio de cultivo;
3. Siga las recomendaciones del fabricante del medio de cultivo.
VI. Principales factores que influyen en la esterilización de los medios de cultivo
1. Composición del medio de cultivo
Las altas concentraciones de materia orgánica, como grasas, azúcares y proteínas, pueden recubrir las células con una fina capa que afecta la conducción del calor. Las altas concentraciones de sales y pigmentos debilitan la resistencia al calor, lo que facilita la esterilización. Por lo general, en los medios con alto contenido de azúcar, 115℃/Se recomienda 30 minutos; para medios generales, 121℃/20 minutos es lo adecuado.
3. Valor del pH
El valor del pH tiene un impacto significativo en la resistencia al calor de los microorganismos. Los microorganismos tienen menos probabilidades de morir a valores de pH entre 6,0 y 8,0. A un pH de 6,0, los microorganismos mueren con relativa facilidad porque el pH penetra fácilmente en las células, alterando sus respuestas fisiológicas y provocando su muerte. Por lo tanto, cuanto más bajo sea el pH del medio de cultivo, más corto será el tiempo de esterilización.
4. Tamaño de las partículas en el medio de cultivo
Las partículas pequeñas son más fáciles de esterilizar, mientras que las partículas grandes son más difíciles de esterilizar. La formación de grumos en el medio de cultivo dará lugar a una esterilización incompleta. 4. Espuma: El aire contenido en la espuma forma una capa aislante, lo que dificulta la penetración del calor y la eliminación de las bacterias que se encuentran en su interior, lo que afecta el efecto de esterilización del medio de cultivo.
5. Expulsión total del aire frío del esterilizador: Para que un esterilizador de vapor a alta presión alcance el vapor saturado, se debe expulsar por completo todo el aire frío. Cuando el vapor contiene aire, la lectura del manómetro no corresponde a la presión real del vapor, sino a la suma de las presiones del vapor y del aire. A la misma presión, el vapor que contiene aire tiene una temperatura más baja que el vapor saturado. Por lo tanto, si hay aire presente cuando el esterilizador alcanza la presión de esterilización requerida, no se alcanzará la temperatura de esterilización, lo que dará lugar a una esterilización ineficaz.
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