Principaux facteurs influençant la stérilisation des milieux de culture

La rigueur avec laquelle est effectuée la stérilisation des milieux de culture a une incidence directe sur les données expérimentales. De nombreux facteurs influencent la stérilisation, notamment les types et les quantités de bactéries contaminantes, ainsi que le choix de la durée et de la température de stérilisation. Aujourd’hui, nous allons passer en revue les principaux facteurs qui influent sur la stérilisation des milieux de culture.

I. Définition de la stérilisation des milieux de culture

Processus consistant à détruire ou à éliminer les cellules végétatives et les spores bactériennes viables d'un milieu de culture à l'aide de méthodes physiques ou chimiques.

II. Objectif de la stérilisation des milieux de culture

Éliminer les micro-organismes présents dans le milieu de culture afin de créer des conditions stériles pour les processus de fermentation ultérieurs.

III. Exigences relatives à la stérilisation des milieux de culture

1. Atteindre le niveau de stérilité requis — 10⁻³

2. Réduire au minimum la destruction des nutriments.

IV. Méthodes de stérilisation des milieux de culture

1. Stérilisation chimique

2. Stérilisation par filtration

3. Stérilisation par chaleur humide

V. Choix de la température de stérilisation du milieu de culture

1. Il convient de tenir compte de la température létale des micro-organismes (celle-ci doit être supérieure à cette température, généralement déterminée en fonction des spores) ;

2. Tout en garantissant l'efficacité de la stérilisation, réduire au minimum la destruction des nutriments présents dans le milieu de culture ;

3. Respectez les recommandations du fabricant du milieu de culture.

VI. Principaux facteurs influant sur la stérilisation des milieux de culture

1. Composition du milieu de culture

Des concentrations élevées de matières organiques, telles que les graisses, les sucres et les protéines, peuvent recouvrir les cellules d'une fine pellicule, ce qui affecte la conduction thermique. Des concentrations élevées de sels et de pigments affaiblissent la résistance thermique, facilitant ainsi la stérilisation. En général, pour les milieux à forte teneur en sucre, 115℃/Une durée de 30 minutes est recommandée ; pour les supports courants, 121℃/20 minutes, c'est parfait.

3. Valeur du pH

Le pH a une incidence significative sur la résistance à la chaleur des micro-organismes. C'est à des valeurs de pH que les micro-organismes sont les moins susceptibles de mourir ​​entre 6,0 et 8,0. À un pH de 6,0, les micro-organismes meurent relativement facilement car le pH pénètre aisément dans les cellules, ce qui altère leurs réactions physiologiques et entraîne leur mort. Par conséquent, plus le pH du milieu de culture est bas, plus le temps de stérilisation est court.

4. Taille des particules dans le milieu de culture

Les petites particules sont plus faciles à stériliser, tandis que les grosses particules sont plus difficiles à stériliser. L'agglomération du milieu de culture entraîne une stérilisation incomplète. 4. Mousse : l'air contenu dans la mousse forme une couche isolante qui empêche la chaleur de pénétrer et de détruire les bactéries présentes à l'intérieur, ce qui nuit à l'efficacité de la stérilisation du milieu de culture.

5. Expulsion totale de l’air froid du stérilisateur : pour qu’un stérilisateur à vapeur haute pression atteigne la vapeur saturée, tout l’air froid doit être complètement expulsé. Lorsque la vapeur contient de l’air, la valeur indiquée par le manomètre ne correspond pas à la pression réelle de la vapeur, mais à la somme des pressions de la vapeur et de l’air. À pression égale, la vapeur contenant de l’air a une température inférieure à celle de la vapeur saturée. Par conséquent, si de l’air est présent lorsque le stérilisateur atteint la pression de stérilisation requise, la température de stérilisation ne sera pas atteinte, ce qui entraînera une stérilisation inefficace.

Le système d'autoclave Zealway contrôle automatiquement l'évacuation de l'air froid afin de garantir un environnement de stérilisation à la vapeur pure et des résultats de stérilisation optimaux. Il propose des programmes spécifiques de stérilisation des milieux de culture, notamment la stérilisation de liquides, la stérilisation de liquides avec isolation thermique et la dissolution de gélose, afin de répondre aux exigences de stérilisation de divers milieux de culture.a.