Méthodes de désinfection et de stérilisation dans les laboratoires de microbiologie

La désinfection et la stérilisation constituent une étape cruciale dans la prévention et le contrôle de la contamination au sein des laboratoires de microbiologie. Tous les instruments et ustensiles utilisés en laboratoire doivent être soumis à des processus rigoureux de désinfection et de stérilisation. Le matériel couramment utilisé comprend notamment la verrerie, les instruments métalliques, les produits en caoutchouc et les produits en plastique. Différentes méthodes de désinfection et de stérilisation sont appliquées à chaque catégorie de matériel.
I. Concepts
La désinfection désigne le processus consistant à éliminer ou à neutraliser les micro-organismes pathogènes présents sur un support de transmission afin de les rendre inoffensifs. Elle peut être classée en deux catégories : la désinfection préventive et la désinfection des foyers épidémiques, selon la présence ou l'absence d'une source d'infection connue.
La stérilisation désigne le processus consistant à éliminer ou à détruire tous les micro-organismes (y compris les spores) présents sur un support de transmission afin d'obtenir un état stérile. Les articles ayant subi une stérilisation sont appelés “ articles stériles ”.
II. Méthodes de désinfection et de stérilisation
À l'heure actuelle, les méthodes de désinfection et de stérilisation couramment utilisées se répartissent principalement en deux grandes catégories : les méthodes physiques et les méthodes chimiques.
Méthodes physiques :

1. Stérilisation par chaleur sèche
   1.1 Stérilisation à l'air chaud
   La stérilisation à l'air chaud permet d'obtenir une stérilisation à haute température à l'aide d'un four de séchage à température constante. En raison de la faible pénétration thermique de la chaleur sèche et de la forte résistance à la chaleur des micro-organismes, une exposition prolongée à des températures élevées est nécessaire pour obtenir la stérilisation. Par conséquent, la température utilisée dans la stérilisation à l'air chaud est généralement plus élevée que celle utilisée dans la stérilisation à la chaleur humide.
   Pour garantir l'efficacité de la stérilisation, les paramètres suivants sont généralement spécifiés. Cette méthode élimine les bactéries et les spores bactériennes afin d'assurer la stérilisation :
   Stérilisation à 135-140 °C pendant 3 à 5 heures ;
   Stérilisation à une température comprise entre 160 et 170 °C pendant 2 à 4 heures ;
   Stérilisation à une température comprise entre 180 et 200 °C pendant 0,5 à 1 heure.
   Il est principalement destiné à la stérilisation de la verrerie, des instruments métalliques difficiles à stériliser dans un autoclave à vapeur sous pression et qui ne risquent pas d'être endommagés par les températures élevées, ainsi que des objets ne pouvant pas entrer en contact avec la vapeur.
   1.2 Méthode d'incinération à la flamme
   Principe : Les objets à stériliser sont exposés à une flamme qui carbonise tous les organismes vivants. Cette méthode est simple et efficace, mais elle endommage considérablement les objets.
   Convient pour : la stérilisation d'articles sans valeur économique et d'instruments expérimentaux qui ne risquent pas d'être endommagés par la combustion, tels que les anses d'inoculation, les pinces, les tubes à essai et les lames.
2. Stérilisation par chaleur humide
   La stérilisation par chaleur humide à la vapeur sous pression est actuellement l'une des méthodes de stérilisation les plus couramment utilisées. Elle exploite la vapeur à haute pression, ainsi que l'effet de chaleur latente et l'excellente capacité de pénétration propres à l'environnement de la vapeur, pour provoquer la coagulation et la dénaturation des protéines bactériennes, tuant ainsi les micro-organismes.
   Il convient à la stérilisation des vêtements de travail en tissu, de divers ustensiles, d'instruments métalliques, de bouchons en caoutchouc, d'eau distillée, de tampons en coton, de papier et de certains milieux de culture.
3. Procédé de stérilisation par rayonnement
   Il s'agit d'une méthode de stérilisation qui utilise une lampe à ultraviolets (UV) pour l'irradiation. Les rayons ultraviolets sont un type de rayonnement électromagnétique de faible énergie capable de détruire divers micro-organismes. Le mécanisme d'action des rayons ultraviolets consiste à inactiver les micro-organismes en endommageant leurs acides nucléiques, leurs protéines et d'autres composants.
   Il convient à la désinfection des paillasses propres, des enceintes de biosécurité et de l'ensemble des salles de laboratoire.
4. Procédé de stérilisation par filtration
   Il s'agit d'une méthode qui permet d'éliminer les micro-organismes présents dans les gaz ou les liquides, en s'appuyant sur le principe selon lequel les bactéries ne peuvent pas traverser des matériaux filtrants denses et poreux. Elle est souvent utilisée pour stériliser des solutions pharmaceutiques ou des matières premières thermolabiles.
   Il convient aux réactifs, aux solutions enzymatiques, aux sérums, aux milieux de culture et à d'autres substances susceptibles de se décomposer, de se dénaturer ou de perdre leur efficacité lorsqu'elles sont exposées à la chaleur.
   Méthodes chimiques :
5. Méthode de stérilisation par désinfectant chimique
   Parmi les désinfectants chimiques couramment utilisés, on peut citer le formaldéhyde, le permanganate de potassium, l'éthanol à 70%-75%, l'acide peracétique, le peroxyde d'hydrogène, le bromure de benzalkonium à 0,1%, l'oxyde d'éthylène, la povidone iodée ou la teinture d'iode.
   Il convient aux objets qui ne peuvent pas être stérilisés par des méthodes physiques, ainsi qu’à l’air, aux plans de travail, à la peau des opérateurs et à certains ustensiles de laboratoire.
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